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步骤一：将枸杞叶片下表皮朝上，用解剖刀在下表皮上轻轻地反复刻画，然后将叶片切成小块后，加入到盛有10mL酶液A的培养皿只能怪，置于36℃下2h后，用镊子轻轻挑动和挤压叶片，再过滤，将滤液离心，获得枸杞叶肉细胞原生质体悬浮液。用同样方法获得矮牵牛花瓣细胞原生质体悬浮液。

步骤二：将等量的矮牵牛花瓣细胞原生质体悬浮液与枸杞叶肉细胞原生质体悬浮液加入到装有20%的PEG溶液的离心管中混合后，离心10min。将分离得到的融合成团的原生质体悬液与含有琼脂的液体培养基混合均匀后冷却，凝固形成很薄的平板。再利用有关显微镜观察、鉴别融合的原生质体。

请分析上述实验，回答下列有关问题：

（1）步骤一中，研究人员在用酶液处理前，首先用“解剖刀在下表皮上轻轻地反复刻画，然后将叶片切成小块”的主要目的是 。

（2）酶液A中应含有的酶的种类包括 。

（3）研究人员“用镊子轻轻挑动和挤压叶片”的主要目的是 。

（4）步骤二中，促进原生质体融合的操作包括 （至少写出两点）。若所有的原生质体均两两融合，则所得到的某一个融合的原生质体中含有的染色体数可能是 ，细胞中的染色体组数可能是 组。

（5）利用显微镜观察能否鉴别出杂种融合的原生质体？答： 。所依据的观察现象是 。

33．（9分）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点，图1中Cmlr表示氯霉素抗性基因，Ner表示新霉素抗性基因。请回答下列问题：

(1)将提取的质粒与外源DNA分别加入缓冲液中，选用相应的限制酶处理时，影响处理效果的外界因素主要是 等（写出两点）。

（2）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒时，能否使用MspⅠ与BamHⅠ同时切割质粒与外源DNA？答： ，原因是 。

（3）可选用 （两种）限制酶同时酶切质粒与外源DNA，酶切并连接后可获得 种含目的基因的重组质粒，筛选含有该重组质粒的大肠杆菌时，需要在含 的培养基上培养。

（4）研究发现当CCGG序列在X酶作用下，其内部胞嘧啶残基发生变化后，MspⅠ仍能识别并切割，但HpaⅡ则不能识别，而BamHⅠ和SmaⅠ对类似变化也十分敏感，KpnⅠ则不敏感。若在含有图1所示质粒和X酶的缓冲液中，同时加入KpnⅠ、HpaⅡ、MspⅠ和SmaⅠ并完全酶切后，则最可能得到 种DNA序列。

（5）为了从基因文库中分离获取T1噬菌体抗性基因，将重组质粒导入对T1噬菌体敏感的大肠杆菌，然后将含有该大肠杆菌的菌液分别接种在预先涂有 的培养基上培养，从而初步检测目的基因的表达。


苏州市2019届高三调研测试答案：

一、单项选择题：

二、多项选择题：

三、非选择题：(本大题包括8个小题，共65分；除特别说明外，其余每空1分)

26．（10分，除注明外，每空1分）（1）①⑦ ⑧ （2）浆 （写出氨基酸（顺序可换）的结构得1分，写出酶得1分，写出产物得1分，共3分）

（3）③⑤⑥（②） 血清（血浆）（答出乳汁、组织液不扣分） （4）置于蒸馏水（或低渗溶液）中，使细胞吸水涨破 缓冲

27．（10分）（1）50mL（等量的）3%的NaHCO3溶液和5张（等量）的叶圆片 观察并记录每个叶圆片浮到水面所需时间 （2）光照强度 NaHCO3溶液浓度（量）（或叶圆片数量） （3）叶圆片光合作用大于呼吸作用（1分），叶肉细胞间隙中的O2增加，使叶圆片上浮（1分） （4）（定义坐标1分，画对柱形1分） （5）不能 以一定梯度设置100W以上光照强度，进一步测定相应的光合速率（叶圆片浮到水面所需时间）

28．（6分）（1）G1→S→G2→M （2）胰蛋白（胶原蛋白）酶 对培养液和用具进行灭菌处理 添加一定量的抗生素 （3）1.53（2分）

29．（8分）（1）①、②（不全不得分） ③ （2）—TACCGAAGA— 一个mRNA分子可以结合多个核糖体，同时合成多条肽链 （3）—甲硫氨酸—丙氨酸—亮氨酸—丝氨酸—（2分） （4）C (增强了密码子的容错性，)有利于维持生物遗传性状的相对稳定

30．（8分）（1）突变的雄性植株与野生雄性植株细胞染色体形态、数目 （2）①1、0 ②0、1 ③0、0 ④常染色体上且为显性 ⑤XAYa或XaYA (3)aa（♀）×A－a(♂)；A－a(♀) ×aa（♂）（写对一组得1分，共2分）

31．（6分）（1）a ①③ （2）神经——体液 （3）甲＜丙＝乙（或甲＜丙，甲＜乙） 乙 蓝色变成砖红色

32．（8分）（1）有利于酶液渗入，与叶肉细胞充分接触 （2）纤维素酶与果胶酶 （3）释放出原生质体 （4）PEG诱导融合和离心 28或62或96 4或6或8 （5）能 原生质体中既有叶绿体，又有红色液泡

33．（9分）（1）温度、PH （2）不能（1分） MspⅠ会切割破坏质粒上的两个标记基因（或tetR与ampR基因）（1分），而BamHⅠ会切割破坏目的基因 （3）KpnⅠ、SmaⅠ 2 新霉素 （4）4 （5）T1噬菌体

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周小川
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